Rastreio de leveduras patogênicas isoladas de fezes de pombos no Distrito Federal-Pombos: propagadores de fungos patogênicos? / Screening for pathogenic yeasts isolated from pigeon droppings in the Federal District-Pigeons: propagators of pathogenic fungi? / Detección de levaduras patógenas aisladas de excrementos de paloma en el Distrito Federal-Palomas: ¿propagadores de hongos patógenos?

Objetivo: Investigar a presença de fungos patogênicos isolados a partir de amostras de fezes de pombos, em locais de atenção a pacientes imunocomprometidos no DF. Método: As amostras foram coletadas em hospitais onde se oferta atendimento a pacientes HIV/AIDS e que tenha uma presença massiva de pombos. Colônias de leveduras foram previamente selecionados em meio Ágar Sabouraud Dextrose acrescido de cloranfenicol, seguindo-se com análise microscópica das estruturas leveduriformes. Colônias de leveduras com suspeita de pertencerem ao gênero Candida spp. ou Cryptococcus sp., foram inoculadas no meio Ágar Cromogênico para identificação das espécies de Candida e em meio Ágar quimicamente definido para indução dos fenótipos de virulência característicos de Cryptococcus sp. Resultados: 100% das amostras analisadas apresentaram crescimento de leveduras do gênero Candida spp. e Rhodotorula sp. No meio Ágar Cromogênico foram identificadas nas amostras C. krusei em 75%; C. tropicalis em 50% e C. glabrata em 15%. Em 15% das amostras foi identificado leveduras do gênero Cryptococcus sp. Conclusão: Dados deste estudo sugerem que fezes de pombo podem estar dispersando leveduras patogênicas e contribuindo com a incidência de infecções fúngicas no DF.

Objective: To investigate the presence of pathogenic fungi isolated from pigeon stool samples, in places of care for immunocompromised patients in the Federal District. Method: The samples were collected in hospitals where care is offered to HIV / AIDS patients and which has a massive presence of pigeons. Yeast colonies were previously selected on Sabouraud Dextrose Agar plus chloramphenicol, followed by microscopic analysis of the yeast structures. Yeast colonies suspected of belonging to the genus Candida spp. or Cryptococcus sp., were inoculated in the Chromogenic Agar medium to identify Candida species and in chemically defined Agar medium to induce the virulence phenotypes characteristic of Cryptococcus sp. Results: 100% of the analyzed samples showed growth of yeasts of the genus Candida spp. and Rhodotorula sp. In the chromogenic agar medium, 75% were identified in C. krusei samples; C. tropicalis in 50% and C. glabrata in 15%. In 15% of the samples, yeasts of the genus Cryptococcus sp. Conclusion: Data from this study suggest that pigeon feces may be dispersing pathogenic yeasts and contributing to the incidence of fungal infections in DF

Objetivo: Investigar la presencia de hongos patógenos aislados de muestras de heces de palomas, en los lugares de atención a pacientes inmunodeprimidos del Distrito Federal. Método: Las muestras se recolectaron en hospitales donde se brinda atención a pacientes con VIH / SIDA y que tiene una presencia masiva de palomas. Las colonias de levadura se seleccionaron previamente en Sabouraud Dextrose Agar más cloranfenicol, seguido de un análisis microscópico de las estructuras de la levadura. Las colonias de levaduras sospechosas de pertenecer al género Candida spp. o Cryptococcus sp., se inocularon en medio de agar cromogénico para identificar especies de Candida y en medio de agar químicamente definido para inducir los fenotipos de virulencia característicos de Cryptococcus sp. Resultados: el 100% de las muestras analizadas presentó crecimiento de levaduras del género Candida spp. y Rhodotorula sp. En el medio agar cromogénico, el 75% se identificó en muestras de C. krusei; C. tropicalis en 50% y C. glabrata en 15%. En el 15% de las muestras, levaduras del género Cryptococcus sp. Conclusión: Los datos de este estudio sugieren que las heces de las palomas pueden estar dispersando levaduras patógenas y contribuyendo a la incidencia de infecciones fúngicas en el DF.

Antimicrobial susceptibility and diarrheagenic diagnosis of Escherichia coli and Salmonella enterica isolated from feral pigeons (Columba livia) captured in Fortaleza, Brazil / Isolamento, sensibilidade antimicrobiana e diagnóstico de cepas diarreiogênicas de Escherichia coli e Salmonella enterica isoladas de pombos urbanos (Columba livia) capturados em Fortaleza, Brasil

This study aimed to isolate Escherichia coli and Salmonella enterica from captured feral pigeons in Fortaleza, Brazil, and, in addition to evaluate the antimicrobial susceptibility profiles and diagnose diarrheagenic E. coli strains. Pigeons were captured in four public locations in Fortaleza with three techniques. Individual cloacal swab samples were collected and submitted to bacterial isolation, biochemical identification and antimicrobial susceptibility test. Disk diffusion technique was used with twelve antibiotics. E. coli strains were submitted to DNA extraction followed by PCR to diagnose five diarrheagenic pathotypes. A total of 124 birds were captured. One bird was positive for Salmonella enterica (0.81%) and 121 (97.58%) were positive for E. coli. Among these, 110 isolates were submitted to antimicrobial susceptibility test and 28.18% (31/110) presented resistance to at least one antibiotic. Resistance to azithromycin was the most frequent (21.82%), followed by tetracycline (10.91%) and sulfamethoxazole with trimethoprim (8.9%). Multidrug resistance, calculated as a resistance to at least 3 antimicrobial classes, was identified in 3.64% (4/110) of strains. The maximum number of antimicrobial classes to which one strain was resistant was seven. Results demonstrated nine different resistance profiles and the most frequent was tetracycline and sulfamethoxazole with trimethoprim (4 strains), followed by chloramphenicol, azithromycin, tetracycline and sulfamethoxazole with trimethoprim (3 strains). Amoxicillin with clavulanic acid and tobramycin presented lowest levels of antimicrobial resistance, to which none of the tested strains were resistant. A single strain was positive for the eltB gene, which is a diagnostic tool to identify the Enterotoxigenic E. coli (ETEC) pathotype. None of the other investigated genes (stx1, stx2, estA, eaeA, ipaH, aatA and aaiC) were identified. The single isolate of S. enterica was a rough strain of Salmonella enterica subsp. enterica, but serotype identification was not possible. However, this isolate presented resistance to amoxicillin, amoxicillin with clavulanic acid, tetracycline and sulfamethoxazole with trimethoprim. Therefore, captured feral pigeons of Fortaleza presented a low prevalence of S. enterica and diarrheagenic E. coli. Considering the investigated pathogens, our results suggest a good health status and a low public health risk. However, important antimicrobial resistance profiles were identified.(AU)

O objetivo deste estudo foi isolar cepas de Escherichia coli e Salmonella enterica de pombos urbanos capturados em Fortaleza, Brasil, e avaliar os perfis de resistência antimicrobiana dos isolados, bem como diagnosticar patotipos diarreiogênicos de E. coli. Pombos foram capturados em quatro locais públicos de Fortaleza utilizando três técnicas. Amostras individuais de suabes cloacais foram coletadas e submetidas a isolamento bacteriano, seguido de identificação bioquímica e teste de susceptibilidade a antimicrobianos. A técnica de disco difusão foi utilizada para avaliar resistência antimicrobiana a doze antibióticos. Cepas de E. coli foram submetidas à extração de DNA seguido de PCR para o diagnóstico de cinco patotipos diarreiogênicos. Um total de 124 aves foram capturadas, a partir das quais em uma houve isolamento de Salmonella enterica (0,81%) e em 121 (97,58%) houve isolamento de E. coli. Destas, 110 isolados foram submetidos a teste de suscetibilidade a antimicrobianos e 28,18% (31/110) apresentaram resistência a pelo menos um antibiótico. Resistência a azitromicina foi a mais frequente (21,82%), seguida por tetraciclina (10,91%) e sulfametoxazol com trimetoprim (8,9%). Resistência a múltiplas drogas foi identificada em 3,64% (4/110) dos isolados e o número máximo de antibióticos aos quais uma única cepa foi resistente foi sete. Resultados demonstraram nove diferentes perfis de resistência e o mais frequente foi tetraciclina e sulfametoxazol com trimetoprim (4 cepas), seguido por cloranfenicol, azitromicina, tetraciclina e sulfametoxazol com trimetoprim (3 cepas). Amoxicilina com ácido clavulânico e tobramicina foram os antibióticos com menor resistência antimicrobiana, aos quais nenhuma cepa apresentou resistência. Uma única cepa foi positiva para o gene eltB que é usado para diagnóstico do patotipo E. coli enterotoxigênica (ETEC), enquanto que os demais genes investigados (stx1, stx2, estA, eaeA, ipaH, aatA e aaiC) não foram identificados. A única cepa de S. enterica isolada foi identificada como uma cepa rugosa de Salmonella enterica subsp. enterica e, portanto, a identificação do sorotipo não foi possível. Entretanto, este isolado apresentou resistência a amoxicilina, amoxicilina com ácido clavulânico, tetraciclina e sulfametoxazol com trimetoprim. Portanto, pombos urbanos capturados em Fortaleza apresentaram baixa prevalência de cepas de S. enterica e E. coli diarreiogênicas. Considerando os patógenos investigados, os resultados encontrados sugerem um bom status sanitário destas aves e um baixo risco à saúde pública. Entretanto, importantes perfis de resistência antimicrobiana foram identificados.(AU)

Caracterização bioquímica e molecular de Cryptococcus spp. isolados de excretas ambientais de pombos (Columba livia domestica) / Biochemical and molecular characterization of Cryptococcus spp. isolates from environmental feces of pigeons (Columba livia domestic)

Os pombos possuem uma rica diversidade de microrganismo, entre eles fungos sapróbios, como do gênero Cryptococcus, que podem atuar como agentes patogênicos para o homem e animais. Objetivou-se o isolamento, a caracterização bioquímica e a molecular de amostras de Cryptococcus spp. de excretas ambientas de pombos. Foram colhidas 100 amostras ambientais de pontos equidistantes e representativos da área da cidade de Araçatuba, São Paulo. As amostras foram rasteladas do solo de vias públicas, armazenadas em frasco coletor e encaminhadas para o Laboratório de Bacteriologia e Micologia da FMVA, onde foram processadas e cultivadas em duplicata, em placas de Petri contendo ágar Sabouraud dextrose a 4% e Niger. Em seguida, foram incubadas à temperatura ambiente e a 30ºC, respectivamente, por um período não inferior a 15 dias. Após a observação diária, as colônias sugestivas para levedura foram reisoladas em ágar Niger e submetidas a testes bioquímicos para posterior caracterização molecular pela técnica da PCR. Como resultado, a caracterização bioquímica e a molecular isolaram 32 colônias leveduriformes, sendo 8% dos cultivos positivos para Cryptococcus neoformans var. neoformans, 17% para Rhodotorula rubidae e 7% Candida albicans. Pelo exposto, concluiu-se que excretas ambientais de pombos constituem um microfoco para Cryptococcus neoformans var. neoformans e outras leveduras com potencial patogênico, representando um risco à saúde pública, sendo necessárias medidas preventivas, como a higienização com a correta remoção das excretas, a fim de minimizar os riscos de exposição ambiental.

Pigeons have a rich diversity of microrganisms, including fungi saprobes such as the genus Cryptococcus that can act as a pathogen for humans and animals. The aim of this was their isolation, biochemical and molecular characterization of samples of Cryptococcus from ambientas avian excreta. One hundred environmental samples,representative of the area equidistant from Araçatuba, São Paulo points were collected. The samples were removed and stored in collection bottles, sent to the Laboratory of Bacteriology and Mycology of FMVA, where they were processed and cultivated in duplicate on Petri dishes containing Sabouraud dextrose 4% and Niger and incubated at room temperature 30° C, respectively, for a period of no less than 15 days. Colonies after daily observation which were suggestive for yeast growth were re-isolated in Niger agar and subjected to biochemical analisis for further molecular characterization by PCR tests. As results, the biochemical and molecular characterization of 32 yeast colonies revealed 8% of cultures positive for Cryptococcus neoformans var. neoformans, 17% Rhodotorula rubidae and 7% Candida albicans. It was concluded that environmental avian excreta are active sites for replication of Cryptococcus neoformans var. neoformans and other yeasts with pathogenic potential. These constitute a public health risk, and preventive measures are necessary, such as cleaning and complete removal of excreta in order to minimize the risk of environmental exposure.

ISOLATION AND MOLECULAR IDENTIFICATION OF POTENTIALLY PATHOGENIC Escherichia coli AND Campylobacter jejuni IN FERAL PIGEONS FROM AN URBAN AREA IN THE CITY OF LIMA, PERU / Isolamento e detecção de Escherichia coli e Campylobacter jejuni potencialmente patogênicos em pombos selvagens de uma área urbana na cidade de Lima, Perú

SUMMARY Feral pigeons (Columbia livia) live in close contact with humans and other animals. They can transmit potentially pathogenic and zoonotic agents. The objective of this study was to isolate and detect strains of diarrheagenic Escherichia coli and Campylobacter jejuniof urban feral pigeons from an area of Lima, Peru. Fresh dropping samples from urban parks were collected for microbiological isolation of E. coli strains in selective agar, and Campylobacterby filtration method. Molecular identification of diarrheagenic pathotypes of E.coliand Campylobacter jejuni was performed by PCR. Twenty-two parks were sampled and 16 colonies of Campylobacter spp. were isolated. The 100% of isolates were identified as Campylobacter jejuni. Furthermore, 102 colonies of E. coli were isolated and the 5.88% resulted as Enteropathogenic (EPEC) type and 0.98% as Shiga toxin-producing E. coli (STEC). The urban feral pigeons of Lima in Peru can act as a reservoir or carriers of zoonotic potentially pathogenic enteric agents.

RESUMO Os pombos selvagens (Columbia livia) vivem em estreito contato com os seres humanos e outros animais. Podem transmitir agentes potencialmente patogênicos e zoonóticos. Os objetivos deste estudo foram isolar e detectar cepas de Escherichia coli diarreiogênica e Campylobacter jejuni de pombos selvagens urbanos de uma área de Lima, Peru. Amostras de fezes frescas foram coletadas em parques urbanos para o isolamento microbiológico para cepas de E. coli em ágar seletivo e Campylobacterpor método de filtração. Identificação molecular de patótipos diarreiogênicos de E. coli e Campylobacter jejuni foi realizado por PCR. Vinte e dois parques foram amostrados e 16 colônias de Campylobacter spp. foram isolados. O 100% dos isolados foram identificados como Campylobacter jejuni. Além disso, 102 colônias de E. coli foram isoladas e 5,88% resultaram como tipo enteropatogênico (EPEC) e 0,98% como produtora de toxina Shiga (STEC). Os pombos selvagens urbanos de Lima no Peru podem atuar como reservatório ou ser portador de agentes zoonóticos entéricos potencialmente patogênicos.

Isolation of cryptococcus neoformans from environmental samples collected in Southeastern Nigeria / Isolamento de Cryptococcus neoformans de amostras ambientais coletadas no sudeste da Nigéria

SUMMARYCryptococcosis caused by Cryptococcus neoformansis the second most common fungal opportunistic pathogen and a lifethreatening infection with serious clinical manifestations especially in HIV/AIDS and other immunocompromised patients. In Nigeria, HIV/AIDS infection has reached an alarming level. Despite this, information on the presence of this fungus in clinical and environmental samples is very scanty in Nigeria and many other parts of Africa. We set out to evaluate the presence of Cryptococcus neoformansor C. gattiiin pigeon droppings obtained from Southeastern Nigeria. One hundred and seventy-seven samples of pigeon droppings from six sample types were collected. The area covered comprised of ten cities and other locations spanning across five States in Nigeria. Using established techniques, Cryptococcus neoformanswas isolated from 39 of the 177 (22.0%) samples overall. No C. gattiiwas isolated. Most of the isolates (32.4%) were recovered from dovecotes (11 of 34) followed closely by samples taken from markets (31.8%; seven of 22) and least from the church (4.0%; one of 25). The highest isolation rate (38.9%) was found in samples from Enugu-Ezike(seven of 23) while the least came from Afikpoand the other locations each with 9.1% isolation rate. This is the first large-scale screening of Cryptococcus neoformansfrom pigeon droppings in Nigeria. The ecological and epidemiological significance of these findings are discussed.

RESUMOA criptococose, causada por Cryptococcus neoformans, é o segundo patógeno fúngico oportunista mais comum em infecções com risco de vida e manifestações clínicas graves, especialmente em HIV/AIDS e outros pacientes imunocomprometidos. Na Nigéria, a infecção pelo HIV/AIDS atingiu um nível alarmante. Apesar disso, informações sobre a presença desses fungos em amostras clínicas e ambientais é muito escassa na Nigéria e em muitas outras partes da África. Propusemo-nos a avaliar a presença de Cryptococcus neoformansou C. gattiiem fezes de pombos obtidos do sudeste da Nigéria. Foram coletadas 177 amostras de fezes de pombos de seis localidades. A área coberta foi composta por dez cidades e outras localidades abrangendo cinco Estados na Nigéria. Usando técnicas estabelecidas, Cryptococcus neoformansfoi isolado de 39 do total de 177 (22,0%) amostras. Nenhuma amostra de C. gattiifoi isolada. A maioria dos isolados (32,4%) foi recuperada de pombais (11 de 34), seguido de perto por amostras colhidas em mercados (31,8%; 7 de 22) e por último na igreja (4,0%; 1 de 25). A maior taxa de isolamento (38,9%) foi encontrada em amostras de Enugu-Ezike (7 de 23), enquanto a menor taxa foi de Afikpo e os outros locais, cada um deles com taxa de isolamento de 9,1%. Esta é a primeira triagem em larga escala de Cryptococcus neoformansem fezes de pombos na Nigéria. A importância ecológica e epidemiológica destes achados é discutida.

Ocorrência de Chlamydophila psittaci em pombos (Columba livia) na cidade de Salvador, Bahia / Occurrence of the pigeon Chlamydophila psittaci in pigeons (Columba livia) within the city of Salvador, Bahia

A existência de populações numerosas de pombos (Columba livia) em centros urbanos, em quase todo o mundo, tem se tornado um risco à saúde pública em vista das zoonoses que podem transmitir. A infecção por Chlamydophila psittaci foi avaliada em pombos que frequentam áreas públicas, como praças, ruas e pontos turísticos na cidade de Salvador, Bahia, por meio da PCR em amostras de fezes frescas, suabes cloacais e orofaríngeos. O estudo revelou uma frequência de infecção por C. psittaci de 11,7% (16/137) dos pombos, e oito dos 10 locais pesquisados apresentavam aves infectadas. A detecção de C. psittaci em amostras de cloaca e orofaringe foi maior (15,8% - 3/19) que em amostras de fezes frescas (11% - 13/118). Os resultados demonstram a ocorrência de infecção por C. psittaci em pombos que habitam as áreas públicas da cidade de Salvador e apontam para a necessária elaboração de medidas de controle e monitoramento das populações de pombos urbanos, bem como de ações voltadas à conscientização da sociedade sobre os riscos à saúde pública.

The existence of numerous pigeon (Columba livia) populations in urban centers, in most of the world, has become a public-health risk given the zoonoses they can transmit. Infection with Chlamydophila psittaci was evaluated in pigeons that frequent public areas, such as squares, streets and tourist sites in the city of Salvador, through PCR from fresh feces samples, cloacal swabs and oropharyngeals. The study revealed a frequency of infection with C. psittaci of 11.7% (16/137) in pigeons, and infected birds were found in eight of the ten locales researched. The detection of C. psittaci in samples of cloaca and oropharyngs was greater (15.8% - 3/19) than in the samples of fresh feces (11% - 13/118). The results show the occurrence of infection with C. psittaciem in pigeons that live in public areas in the city of Salvador and points to the necessity of elaborating control and monitoring measures for the populations of urban pigeons as well as developing actions that will raise society´s awareness of these risks to public health.

O pombo (Columba livia) como agente carreador de Salmonella spp. e as implicações em saúde pública / The pigeon (Columba livia) as a carrier agent of Salmonella spp. and public health implications

Os pombos domésticos e silvestres estão distribuídos por todo o mundo e carreiam micro-organismos patogênicos ao homem e a outros animais, podendo ser um dos responsáveis pela disseminação de Salmonella spp. Este patógeno gera grande preocupação para a economia mundial, uma vez que cria transtornos para a indústria avícola quando ocorre contaminação dos plantéis e ônus para a saúde pública devido a surtos de infecção alimentar causados por esta bactéria. Dessa forma, objetivou-se realizar um levantamento acerca da participação do pombo doméstico na possível disseminação de Salmonella spp.(AU)

Domestic and wild pigeons are distributed throughout the world and carrie micro-organisms that are pathogenic to humans and other animals. They can be one of the animals in charge of the dissemination of Salmonella spp., pathogen of great concern for the world economy as it creates inconvenience to the poultry industry when there is contamination of herds and impacts on public health due to outbreaks of foodborne infection caused by this bacterium. Therefore, the objective was to conduct a survey about the participation of the domestic pigeon in the possible dissemination of Salmonella spp.(AU)

Salmonella Yeerongpilly in a Chinese Owl (Columba livia domestica) in Jamaica.

Salmonella infection in bird species in Jamaica was studied. This revealed that very low prevalence of salmonellosis was found (0.32 %). Salmonella Yeerongpilly (newly reported in the country) was isolated from a bird collected at a bird aviary. This study showed that there was the presence of this Salmonella serovar in a Chinese owl (Columba livia domestica) in Jamaica. There were not published reports from Caribbean Islands of the presence of this serovar. Salmonella Yeerongpilly belongs to serogroup E1 and by molecular serotyping random amplification of polymorphic DNA (RAPD) fingerprinting belongs to A20, B17 and C21. This strain was isolated in Queensland Australia in the 1960s before the successful Salmonella eradication campaign. This study suggests that a larger investigation in pet birds as Salmonella carriers should be carried out in Jamaica. Mandatory screening or quarantine of birds entering the country should be institutionalized.

FIRST REPORT ON Cryptococcus neoformans IN PIGEON EXCRETA FROM PUBLIC AND RESIDENTIAL LOCATIONS IN THE METROPOLITAN AREA OF CUIABÁ, STATE OF MATO GROSSO, BRAZIL / Primeiro registro de Cryptococcus neoformans em excretas de pombos provenientes de locais públicos e residenciais de área metropolitana de Cuiabá, Estado do Mato Grosso, Brasil

SUMMARY Cryptococcosis is a severe systemic mycosis caused by two species of Cryptococcus that affect humans and animals: C. neoformans and C. gattii. Cosmopolitan and emergent, the mycosis results from the interaction between a susceptible host and the environment. The occurrence of C. neoformans was evaluated in 122 samples of dried pigeon excreta collected in 49 locations in the City of Cuiabá, State of Mato Grosso, Brazil, including public squares (n = 5), churches (n = 4), educational institutions (n = 3), health units (n = 8), open areas covered with asbestos (n = 4), residences (n = 23), factory (n = 1) and a prison (n = 1). Samples collected from July to December of 2010 were seeded on Niger seed agar (NSA). Dark brown colonies were identified by urease test, carbon source assimilation tests and canavanine-glycine-bromothymol blue medium. Polymerase chain reaction primer pairs specific for C. neoformans were also used for identification. Cryptococcus neoformans associated to pigeon excreta was isolated from eight (6.6%) samples corresponding to six (12.2%) locations. Cryptococcus neoformans was isolated from urban areas, predominantly in residences, constituting a risk of acquiring the disease by immunocompromised and immunocompetent individuals. .

RESUMO A criptococose é micose sistêmica potencialmente grave causada por duas espécies do gênero Cryptococcus que acometem tanto homens como animais: Cryptococcus neoformans e C. gattii. São infecções cosmopolitas e emergentes, resultantes da interação do hospedeiro - humano e animal versus meio ambiente. A proposta deste trabalho foi avaliar a ocorrência de C. neoformans em 122 amostras de excretas secas de pombos coletadas em 49 locais na cidade de Cuiabá, Estado do Mato Grosso, Brasil, incluindo: praças públicas (n = 5), igrejas (n = 4), instituições de ensino (n = 3), unidades de saúde (n = 8), áreas abertas exibindo cobertura de amianto (n = 4), conjuntos residenciais domiciliares (n = 23), uma fábrica (n = 1) e um presídio (n = 1). Semeadura de suspensão de amostras em meio ágar niger (NSA), identificação fenotípica por provas bioquímicas e teste em meio de canavanina-glicina-azul de bromotimol, das colônias isoladas com pigmentação marrom escura. Foi também utilizada a técnica da reação em cadeia da polimerase com pares de iniciadores específicos para identificação de C. neoformans. As amostras foram coletadas de julho a dezembro de 2010. Cryptococcus neoformans foi isolado em oito (6,6%) de 122 amostras correspondendo a seis (12,2%) dos 49 sítios analisados. Cryptococcus neoformans associado a excretas de pombos ocorre em áreas de Cuiabá, predominando em residências nas amostras analisadas, constituindo fator de risco potencial para aquisição da doença tanto para indivíduos imunocomprometidos como imunocompetentes. .

Isolation of cryptococcus spp. in excrements of pigeons (columba sp.) in the Maringá city, Pr, Brazil / Isolamento de cryptococcus spp. em excretas de pombos (columba sp.) na cidade de Maringá, Pr, Brasil

The Cryptococcus genus is composed by 37 different species, however, the C. gattii and C. neoformans are the two most concerning species once they cause deep mycosis in humans. In this way, the present study had as aim to perform an analysis in droppings of pigeon (Columba sp.) from the city of Maringá, PR, in order to verify the presence of suggestive yeast forms of Cryptococcus spp. For this study 70 samples of pigeon excrements were evaluated which were collected in 7 different sites. These samples were submitted to the tests of thermotolerance at 37°C, urease, phenoloxidase activity and direct exam with China ink preparation. The results show that the pigeon droppings of 5,7% of the studied samples presented suggestive yeast forms of Cryptococcus spp. These results are relevant due to the positive samples are from the sites with a higher possibility of immunocompromised individuals flow, who are more up to have the most severe kinds of the disease caused by this fungi.

O gênero Cryptococcus é composto de 37 espécies diferentes, contudo o C. gattii e C. neoformans são as mais preocupantes por causarem micose profunda em humanos. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo realizar uma análise em excretas de pombos (Columba sp.) procedentes da cidade de Maringá, PR, para verificar a presença de leveduras sugestivas de Cryptococcus spp. Para este estudo foram analisadas 70 amostras de excretas de pombos, coletadas em sete localidades diferentes. Essas amostras foram submetidas ao teste de termotolerância à 37°C, urease, atividade fenoloxidase e exame direto com tinta da china. Os resultados demonstraram que nos excrementos de pombos de 5,7% das localidades estudadas apresentaram leveduras sugestivas de Cryptococcus spp. Estes resultados mostraram-se relevantes, devido ao fato de as amostras positivas pertencerem aos locais de maior possibilidade de circulação de indivíduos imunocomprometidos, os quais estão mais propícios a contrair as formas mais graves da doença causada por este fungo.

Ocorrência de Cryptococcus neoformans em fezes de pombos na cidade de Caratinga, MG - Brasil / Occurrence of Cryptococcus neoformans in pigeon droppings in the city of Caratinga, MG - Brazil

Cryptococcus neoformans é uma levedura encapsulada de grande importância médica, por ser o agente etiológico da criptococose. É encontrada em fontes ambientais, incluindo fezes de pombos, constitituindo-se em importante causa de morbidade e mortalidade em indivíduos imunodeprimidos em todo o mundo. Contudo, ainda não há estudos sobre sua ecologia na cidade de Caratinga. Para pesquisar fontes saprofíticas de C. neoformans, foram coletadas 30 amostras de excretas de pombos em 10 diferentes locais. A levedura foi isolada em todos os locais pesquisados em 27 (90%) amostras, confirmando sua ocorrência em fontes ambientais na cidade de Caratinga, MG.

Cryptococcus neoformans is encapsulated yeast of great medical importance once it is the etiologic agent of cryptococcosis. It is found in environmental sources, including pigeon droppings, being an important cause of morbidity and mortality in immunocompromised individuals worldwide. However, there are no studies on its ecology in the city of Caratinga. In order to search saprophytic sources of C. neoformans, a total of 30 samples of pigeon droppings in 10 different locations were collected. The yeast was isolated in 27(90%) samples in the areas were the research was carried out in, confirming their occurrence in environmental sources in the city of Caratinga, MG.

Presencia de Cryptococcus neoformans en excretas de palomas urbanas en San Miguel de Tucumán - Argentina / Presence of Cryptococcus neoformans in urban pigeons excreta from San Miguel de Tucumán – Argentina

Con la finalidad de detectar la presencia del complejo Cryptococcus neoformans en excretas de palomas (Columba livia) que habitan los espacios públicos del perímetro urbano de San Miguel de Tucumán, Argentina, se recogieron 100 muestras de 5 localizaciones diferentes. Como medio de aislamiento se empleó Agar-Semillas de Níger y las levaduras fueron identificadas mediante la presencia de cápsula, prueba de la ureasa, producción de fenol-oxidasa, asimilación de carbohidratos y crecimiento a 37°C. La especie fue determinada usando el medio Canavanina-Glicina-Azulde bromotimol. C. neoformans var. neoformans fue aislado en todas las 55 muestras de las áreas estudiadas, reflejando una amplia distribución en la zona céntrica de la ciudad preferentemente en excretas secas acumuladas. La sensibilidad in vitro frente a Fluconazol, Itraconazol, Anfotericina B y Voriconazol fue determinada por el método de difusión en placa usando tabletas Neo-Sensitabs. Todos los aislamientos fueron sensibles a los antifúngicos testeados.

With the purpose of detecting the presence of Cryptococcus neoformans complex in excreta of pigeons inhabitating public spaces belonging to the urban perimeter of San Miguel de Tucumán, Argentina, one hundred samples were collected from five different locations. Niger seed agar plates were used as means of isolation and yeasts were identified through the presence of capsule, urease test, fenoloxidase production, carbohydrate assimilation and growth at 37ºC. Species was determined with the CGB method. C. neoformans var. neoformans was isolated in all 55 samples of the studied areas showing a wide distribution downtown, mainly in dried excreta settlings. In vitro sensibility in front of Fluconazol, Itraconazol, Anfotericina B and Voriconazol was fixed by means of the diffusion method by using Neo-Sensitabs tablet. All isolations proved to be sensible to the tested antifungal.

Brote de histoplasmosis en la Escuela de Cadetes de la Base Aérea de Morón, Provincia de Buenos Aires, República Argentina / Histoplasmosis outbreak in Morón, Buenos Aires Province, Argentina

Se describe un brote de histoplasmosis que afectó a 6 cadetes de la Fuerza Aérea Argentina, sin antecedentes patológicos previos. Todos consultaron por problemas respiratorios después de haber limpiado un hangar. En ese recinto se encontraron abundantes deyecciones de animales, presuntamente de palomas y murciélagos. Los pacientes sufrieron fiebre, mialgias, taquipnea y tos no productiva. Las radiografías y tomografías de tórax mostraron imágenes pulmonares micronodulares, engrosamiento de los tabiques interalveolares y adenopatías hiliares. Todos tuvieron una evolución favorable y no requirieron tratamiento antifúngico. Las pruebas de inmunodifusión y contrainmunoelectroforesis con antígenos de Histoplasma capsulatum fueron positivas, al igual que las intradermorreacciones con histoplasmina. Se recogieron 5 muestras de tierra del lugar, las que fueron inoculadas por vía intraperitoneal a 20 hámsteres. De los cultivos de hígado y bazo de dichos animales se consiguió aislar la fase micelial de H. capsulatum. La cepa aislada se comparó con las obtenidas de 12 pacientes argentinos utilizando perfiles genéticos y se observó un clado único con más de 96% de similitud, lo que confirma la homogeneidad de las cepas argentinas. Si bien la histoplasmosis es endémica en la Pampa húmeda, este es el primer brote totalmente documentado al sur del paralelo 34°.

An histoplasmosis outbreak affecting 6 previously healthy Air Force cadets is herein presented. The patients suffered from fever and respiratory symptoms after having cleaned an abandoned hangar soiled with pigeons and bat droppings. They all presented fever, myalgia, tachypnea, and nonproductive cough. Chest X-ray and CT scan studies showed disseminated reticulonodular images affecting both lungs. Hiliar adenomegalies were also observed. All patients achieved a favourable outcome without antifungal treatment. Both serologic tests searching for specificic antibodies (immunodiffusion and counterimmunoelectrophoresis) and histoplasmin skin tests were positive in all cases. Five soil samples mixed with pigeons and bat droppings were collected from the hangar. Suspensions of these samples were inoculated into 20 hamsters by intraperitoneal injection; mycelial phase of H. capsulatum was isolated from liver and spleen cultures. The genetic profile of this strain was compared with 12 isolates obtained from Argentinean patients, and a great degree of homogeneity was observed (> 96% similarity). Although histoplasmosis is endemic in the wet Pampas, this is the first epidemic outbreak reported south of the 34th parallel.

Ocorrência de Cryptococcus neoformans em excretas de pombos na cidade de Pelotas, Estado do Rio Grande do Sul / Occurrence of Cryptococcus neoformans in pigeon excrement in the city of Pelotas, State of Rio Grande do Sul

INTRODUÇÃO: O Cryptococcus neoformans é uma levedura capsulada, agente etiológico da criptococose em humanos e animais, encontrado em fontes ambientais, incluindo excretas de pombos, é uma importante causa de mortalidade em indivíduos imunodeprimidos em todo o mundo. MÉTODOS: Com o objetivo de verificar a ocorrência do Cryptococcus neoformans, em excretas de pombos, na Cidade de Pelotas, pesquisou-se 70 ambientes, incluindo prédios, praças e locais ao ar livre, da Cidade de Pelotas, RS. Após a coleta, os excrementos foram adicionados de salina com cloranfenicol, homogeneizados, semeados em ágar Sabouraud com cloranfenicol e ágar Níger e incubados a 32ºC. Para identificação, realizou-se exame direto, prova da fenoloxidase, urease, assimilação de carboidratos e cultura em meio CGB. RESULTADOS: Dos locais estudados (nº =70), em 26 (37,1 por cento) havia excretas de pombos. Estes lugares foram representados por prédios históricos (nº =8), torre de igreja (nº =1), engenhos e armazéns de arroz (nº =7), praça (nº =1) e locais ao ar livre (nº =9), o isolamento de Cryptococcus neoformans ocorreu em 26,9 por cento (nº =7/26), destes locais. CONCLUSÕES: O estudo chama a atenção, para o isolamento do fungo em áreas urbanas, que apresentavam grande acúmulo de excretas, indicando um risco para a saúde pública, especialmente para indivíduos imunocomprometidos.

INTRODUCTION: Cryptococcus neoformans is an encapsulated yeast and is the etiological agent for human and animal cryptococcosis. It is found in sources within the environment, including pigeon excrement, and is an important cause of mortality among immunocompromised individuals worldwide. METHODS: Seventy different environments in the city of Pelotas, Rio Grande do Sul, were surveyed for the purpose of investigating Cryptococcus neoformans occurrences in pigeon excreta. The environments included buildings, public squares and outdoor locations in the city. After collection, chloramphenicol saline solution was added to the excreta, which were then homogenized and seeded onto Sabouraud agar with chloramphenicol and onto Niger agar, and incubated at 32°C. Identification was performed by direct examination and by means of the phenoloxidase and urease tests, carbohydrate assimilation and culturing in CGB medium. RESULTS: Out of the sites investigated (n = 70), 26 (37.1 percent) of them contained pigeon excreta. These included historical buildings (n = 8), a church tower (n = 1), rice mills and warehouses (n = 7), a public square (n = 1) and outdoor locations (n = 9). Cryptococcus neoformans was isolated from 26.9 percent (n = 7/26) of these locations. CONCLUSIONS: This study draws attention to isolation of this fungus in urban areas that present large accumulations of pigeon excrement. This represents a risk to public health, especially for immunocompromised individuals.

Evidence of zoonotic Chlamydophila psittaci transmission in a population at risk in Zulia state, Venezuela / Evidencia de transmisión zoonótica de Chlamydophila psittacci en una población de riesgo del Estado Zulia, Venezuela

Objective This study was aimed at investigating the frequency of infection by Cp. psittaci and determining its genotype in individuals at potential risk of exposure to the bacteria. Methodology The study involved 170 individuals: a risk group (n= 96) and a low-risk control group (n=74). Cp. psittaci was detected and genotyped by single-tube nested PCR and ompA gene sequencing. Results Eight (8.3 %) positive cases were detected in the risk group and 1 (1.4 %) in the control group (p<0.04). Cp. psittaci was found in 16.7 % of pigeons' fecal samples. Cp. psittaci infection with was more frequent in symptomatic (17.7 %) than asymptomatic (6.3 %) individuals in the risk group. Analysing the genomes isolated from human and bird specimens revealed the presence of genotype B. Conclusion The presence of Cp. psittaci genotype B in the population being evaluated could have been attributed to zoonotic transmission from pigeons to humans, an underestimated potential public health problem in Venezuela requiring the health authorities' involvement.

Objetivo El objetivo de este estudio fue investigar la frecuencia de infecciones por Cp. psittaci y determinar su genotipo en individuos con potencial riesgo de exposición a la bacteria. Metodología Se incluyeron 170 individuos, un grupo de riesgo (n=96) y un grupo control (n=74). La detección y genotipificación de Cp. psittaci se llevó a cabo por PCR anidada y secuenciación del gen ompA. Resultados Se detectaron ocho (8,3 %) casos positivos en el grupo de riesgo y 1 (1,35 %) en el grupo control (p<0,04). Cp. psittaci fue detectada en 16,7 % muestras fecales de palomas. En el grupo de riesgo, la frecuencia de infección por Cp. psittaci fue 17,7 % en individuos sintomáticos y 6,3% en asintomáticos. El análisis de los genomas aislados de muestras humanas y aves, revelaron la presencia del genotipo B. Conclusión La presencia de Cp. psittaci genotipo B en la población evaluada podría ser atribuida a transmisión zoonótica de palomas a humanos, un potencial problema de salud pública en nuestra región que requiere la intervención de autoridades sanitarias.

Coniochaetidium zulianensis: a new record in the world

Basado en un estudio de hongos coprofílicos en el estado Zulia, Venezuela, una especie de la familia Coniochaetaceae, la cual presenta un ascocarpo tipo cleistotecio y ascósporas con poro germinativo, fue aislada de heces de paloma. Ésta fue identificada como una especie del género Coniochaetidium Malloch and Cain., la cual difiere de las otras cinco (5) especies descritas, en sus características morfológicas, presenta 8 esporas, ascas globosas y ascósporas elipsoidales. Además difiere de las otras porque las ascósporas desarrolladas en medios de cultivo son más largas, casi el doble de largo. La especie fue identificada como Coniochaetidium zulianensis Delgado, Urdaneta y Piñeiro, la cual representa un nuevo registro en el mundo.

On the basis of a study of coprophilous fungi from Zulia state, Venezuela, one specie of the family Coniochaetaceae, with cleistothecial ascocarp and ascospores with germ pore was isolated from dove dung. It was identified as species of Coniochaetidium Malloch and Cain. The species described in this paper differs from the other five (5) species in its morphological characteristic, globose asci, 8 spored and ellipsoidal ascospores, also this species differs from another by having larger ascopores, which are nearly double its length in culture. The species was identified as Coniochaetidium zulianensis Delgado, Urdaneta and Piñeiro, which represents a new record in the world.

Serotype and mating type characterization of Cryptococcus neoformans by Multiplex PCR

Cryptococcus neoformans is an encapsulated yeast, etiological agent of cryptococcosis. The species is commonly associated with pigeon droppings and plant materials. The aim of the present work was to verify the presence of the yeast in pigeon droppings, and to identify the isolates obtained in serotypes and mating types (MAT). Ten samples of pigeon droppings were collected in the rural area of the city of Alfenas, Brazil. Samples were inoculated in agar Niger medium for fungal isolation and 22 isolates with characteristics of C. neoformans were obtained. The serotypes and MAT were determined by multiplex PCR using specific primers. Serotypes were also determined by using the Kit Crypto Check. Among the 22 samples evaluated, eight were identified as C. neoformans by classic identification tests. These samples were characterized as serotype A by the Kit Crypto check and as serotype A MAT alpha by the multiplex PCR. The present study reinforces the evidence that pigeon droppings are a reservoir for C. neoformans and confirms the prevalence of C. neoformans var. grubii (Aalpha) among environmental isolates. It also demonstrates that multiplex PCR is an acceptable alternative for serotype analysis because it reduces the costs for each reaction and analyses serotype and MAT simultaneously.

Cryptococcus neoformans é levedura encapsulada, agente etiológico da criptococose. As espécies são comumente associadas com fezes de pombos e material vegetal. O objetivo do presente trabalho foi verificar a presença de leveduras em fezes de pombos e identificar os isolados em relação aos sorotipos e "mating types". Dez amostras de fezes de pombos foram coletadas na zona rural da cidade de Alfenas, Brasil. As amostras foram inoculadas em agar Niger e 22 isolados com características de C. neoformans foram obtidos. Os sorotipos e "mating types" foram determinados pela PCR multiplex e os sorotipos foram identificados também pelo Kit Crypto Check. Dentre as 22 amostras avaliadas, oito foram identificadas como C. neoformans através dos testes clássicos. Estas amostras foram caracterizadas como sorotipo A pelo Kit Crypto check e como sorotipo A MATalfa pela PCR multiplex. O presente estudo reforça a evidência de que as fezes de pombos constituem reservatório para C. neoformans e confirma a prevalência de C. neoformans var. grubii (Aalfa) nos isolados ambientais. PCR multiplex é uma alternativa aceitável para análise do sorotipo porque reduz os custos de cada reação e analisa simultaneamente os sorotipos e "mating type".

Detección de algunos agentes zoonóticos en la paloma doméstica (Columba livia) en la ciudad de Chillán, Chile / Detection of some zoonotic agents in the domestic pigeon (Columba livia) in the city of Chillán, Chile

Introducción: En las últimas décadas, se ha detectado un aumento de las poblaciones de palomas (Columba livia) y un mayor contacto con personas sanas e inmunocomprometidas. Objetivos: detectar algunos agentes zoonóticos en la paloma doméstica (Columba livia) en la ciudad de Chillán. Materiales y Métodos: Desde octubre de 2002 hasta septiembre de 2003 fueron capturadas 100 palomas. Se tomaron muestras de sangre, órganos y contenido intestinal de cada una de ellas, para ser cultivadas en diferentes tipos de agar, de acuerdo al microorganismo buscado. La identificación de hongos se efectuó mediante estudio de morfología con azul de metileno al 2%. Para la detección de Chlamydophila psittaci se realizó un examen serológico utilizando un kit comercial de ELISA (IDEXX). Resultados: se registraron palomas positivas frente a: clamidiosis (11%), estafilococcosis (8%), salmonelosis (4%) y aspergilosis (1%). No se detectaron palomas con evidencias de criptococcosis y listeriosis. Conclusiones: La paloma doméstica de la ciudad de Chillán actúa como portador de agentes zoonóticos de importancia en salud pública.

Introduction: There is an increase in the population of doves (Columba livia) as well as their contact with healthy and immunocompromised hosts. Objectives: detection of some zoonotic agents of the domestic pigeon (Columba livia) in Chillán city, Chile. Materials and Methods: From October 2002 to September 2003, 100 domestic pigeons were captured. Blood, organs and intestine contents were sampled from each pigeon. The samples were cultivated in different kinds of agar according to the searched microorganism. Fungi were typified by morphological studies after staining with 2% methilene blue. For the detection of Chlamydophila psittaci a commercial Elisa kit (IDEXX) was used. Results: Pigeons were registered positive for: clamidiosis (11%), staphylococosis (8%), salmonellosis (4%) and aspergillosis (1%). No pigeon had evidence of cryptococosis and listeriosis. Conclusions: these results confirm that domestic pigeon could act as vector of zoonotic agents of public health importance.

Comportamento de amostras ambientais e clínicas de Cryptococcus neoformans frente a fungicidas de uso agronômico e ao fluconazol / Behaviour azole fungicide and fluconazole in Cryptococcus neoformans clinical and environmental isolates

Avaliou-se a atividade de fungicidas azólicos de uso agronômico (epoxiconazol, difenoconazol e ciproconazol) em comparação ao antifúngico de uso terapêutico fluconazol sobre 23 amostras ambientais de Cryptococcus neoformans var neoformans isoladas de fezes de pombos, as quais foram coletadas em fazendas com práticas agrícolas empregando compostos azólicos e 11 amostras clínicas isoladas de pacientes portadores de criptococose. Os testes de sensibilidade foram realizados pela técnica de diluição em agar. A concentração inibitória mínima capaz de inibir 50 por cento dos isolados ambientais (CIM 50) foi de 6,0µg/mL para epoxiconazol, 1,0µg/mL para difenoconazol, 2,0µg/mL para ciproconazol e 64,0µg/mL para fluconazol. Entre os isolados clínicos os valores de CIM 50 foram 2,0µg/mL, 0,38µg/mL, 1,0µg/mL e 16,0µg/mL para epoxiconazol, difenoconazol, ciproconazol e fluconazol, respectivamente. Os valores de CIM 50 em relação aos isolados de origem ambiental foram maiores do que os valores para os isolados de origem clínica. Em nosso estudo, frente ao mesmo antifúngico, as amostras ambientais apresentaram comportamento significativamente diferente em relação às amostras clínicas (p < 0,05). Diferenças (p<0,05) também foram observadas entre os valores de concentração inibitória apresentados pelo fluconazol e os outros antifúngicos de uso agronômico tanto no grupo dos isolados ambientais quanto clínicos.

The activity of azole fungicides for agronomical use (epoxiconazole, difenoconazole and cyproconazole) was evaluated in comparison with the therapeutic antifungal agent fluconazole, on 23 environmental samples of Cryptococcus neoformans var neoformans isolated from pigeon feces that were collected from farms with agricultural practices using azole compounds, and on 11 clinical samples isolated from patients with cryptococcosis. Sensitivity tests were performed using the agar dilution technique. The minimum inhibitory concentration capable of inhibiting 50 percent of the environmental isolates (MIC 50) was 6.00µg/ml to epoxiconazole, 1.00µg/ml for difenoconazole, 2.00µg/ml for cyproconazole and 64.00µg/ml for fluconazole. Among the clinical isolates the MIC 50 values were 2.00µg/ml, 0.38µg/ml, 1.00µg/ml and 16.00µg/ml for epoxiconazole, difenoconazole, cyproconazole and fluconazole, respectively. The MIC 50 values for environmental isolates were greater than the MIC 50 values for clinical isolates. In our study, in relation to the same antifungal agent, the environmental samples presented significantly different behaviour in relation to the clinical samples (p<0.05). Differences in the MIC values (p<0.05) presented by fluconazole and the other antifungal agents for agronomical use, both in the environmental isolates and in the clinical isolates, were also observed.

Cryptococcus neoformans strains isolated from church towers in Rio de Janeiro City, RJ, Brazil

Cryptococcus neoformans é um fungo que ocasiona micose de alta morbidade e mortalidade, especialmente em pacientes com Aids. Muitos reservatórios de C. neoformans têm sido relatados, mas a ecologia desta levedura deve ser ainda elucidada para se estabelecer programas de vigilância e prevenção desta infecção. O objetivo deste estudo foi o de avaliar a presença de C. neoformans no Rio de Janeiro, RJ, Brasil. Dez igrejas foram selecionadas para este estudo, coletando-se fezes de pombo, amostras de ar, das torres das igrejas e de áreas vizinhas, durante um ano. Os resultados revelaram que C. neoformans estava presente em todas as igrejas e em 37,8% das 219 amostras das excretas das aves. Ao mesmo tempo, o fungo foi isolado do solo, insetos, ovos e ninhos de pombos. Quinze (4,9%) do total das amostras de ar foram positivas. O crescimento no meio de CGB revelou que todas as amostras pertenciam a C. neoformans var. neoformans, e 98,8% destas amostras pertenciam ao sorotipo A.